1___________ Identificación varietal
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Multiplicación de Plantas
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Análisis Viral (a
partir del segundo semestre del 2011)
_____________________________________________3Servicios
para usted y su empresa...
Identificación
varietal
La constante necesidad de mejorar calidad y rendimiento ha
producido en el último siglo una enorme cantidad de
variedades en casi todas las especies cultivadas.
En el caso particular del arándano (Vaccinium spp.
L.), la mayoría de las variedades que se cultivan comercialmente
son resultado de programas de mejoramiento y selección.
Un aspecto determinante para la comercialización de
estos productos agrícolas es su correcta identidad
genética, considerada un factor clave de calidad.
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Los métodos
tradicionales de identificación y caracterización
de cultivares en frutales están basados en caracteres
morfológicos, los cuales están sujetos
a influencias ambientales y pueden conducir a errores.
En cultivos como el arándano estos métodos
son de difícil aplicación debido a la
elevada similitud morfológica entre las variedades.
Actualmente la mejor forma para la identificación
genética de plantas y diferenciación de
variedades es el análisis de regiones específicas
del genoma (ADN cromosomal) de las plantas, conocidos
como marcadores moleculares.
Entre los marcadores moleculares
más utilizados con fines de genotipificación
se encuentran los microsatélites (SSR o Simple
Sequence Repeat), los cuales se encuentran dispersos
a través de todo el genoma de la planta. Además
son altamente polimórficos y reproducibles, por
lo cual constituyen marcadores muy utilizados para estudios
genéticos. Otro de los marcadores empleados con
estos fines son los ISSR (Inter Simple Sequence Repeat).
La técnica de ISSR es de por sí más
sencilla y menos costosa que los microsatélites,
además la información que entregan y su
alto polimorfismo es suficiente para ser utilizado en
protocolos de trazabilidad genética y diferenciación
de genotipos.
Tomando como base estos antecedentes,
en nuestros laboratorios se han desarrollado plataformas
moleculares mediante marcadores ISSR y microsatélites
que permiten la genotipificación y trazabilidad
genética de las variedades de arándano
que se cultivan comercialmente en Chile.
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Se trabaja actualmente con variedades
comerciales de arbusto alto: Misty, Toro, Bluecrop,
Elliott, Brigitta, Patriot, Duke, Aurora, Legacy, Earlyblue,
O’Neal, Liberty, Bluegold, Sierra, Nelson, y Berkeley,
así como de ojo de conejo: Climax, Tifblue, Premier
y Brightwell. Para ello se están usando dos grupos
de 8 partidores para cada unos de los dos tipos de marcadores
moleculares que se están utilizando. Estos marcadores
fueron previamente evaluados y seleccionados en base
al nivel de polimorfismo que presentan.
Este servicio permite determinar
la identidad de variedades de arándanos a lo
largo de toda la cadena productiva, ya sea en plantas
in vitro, plantas de vivero, plantas de campo, frutos
y jugos concentrados.
Hoy en día la identificación
varietal de las plantas es una herramienta importante,
que permite a los agricultores y a las empresas exportadoras
de fruta fresca y procesada dar seguridad a sus compradores
respecto del origen de las plantas con las que se está
trabajando. De la misma forma, aquellas empresas dedicadas
a la propagación y venta de plantas (viveros),
necesitan dar certeza a los compradores respecto de
la calidad y originalidad de las variedades que están
comercializando.
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Producción de
Plantas
La micropropagación "in vitro" de plantas
es una técnica que utiliza pequeños trozos de
tejido o de órganos en condiciones asépticas,
con el fin de conseguir nuevas plantas idénticas a
la planta madre.
Esto se consigue gracias a que las células de las plantas
son "totipotentes"; es decir, tienen una capacidad
latente para regenerar una planta nueva a partir de una única
célula, de manera que la nueva planta será genéticamente
idéntica a la planta madre.
El cultivo in vitro permite entre otras muchas cosas una rápida
propagación vegetativa de las plantas, y una mejora
del estado sanitario de las mismas.
Los arándanos son una de las pocas especies frutales
en que la propagación in vitro puede realizarse exitosamente,
tanto desde el punto de vista técnico como del comercial.
Básicamente, consiste en el cultivo, en un medio nutritivo
compuesto de macroelementos, microelementos, vitaminas y reguladores
de crecimiento, de microestacas bajo condiciones de total
asepsia.
Una vez obtenidos los brotes in vitro ellos son sometidos
a enraizamiento in vitro o ex vitro, siguiendo aproximadamente
el mismo procedimiento utilizado para las estacas con hojas.
Debido a la adición de reguladores de crecimiento al
medio de cultivo in vitro las plantas revierten a su estado
de juvenilidad y por lo tanto adquieren una mejor capacidad
de enraizamiento. Por esta razón el enraizamiento es
casi de un 100% si se utiliza material in vitro. El material
una vez enraizado se trasplanta a bolsas plásticas
y se cultivan en la misma forma que estacas convencionales
por un período de 1-2 años.
Plantas provenientes de cultivo in vitro han demostrado poseer
una mayor tendencia a la brotación lateral, lo que
aumenta el potencial productivo de la especie, particularmente
durante los años previos a la plena producción.
La micropropagación tiene la ventaja adicional de propagar
material libre de enfermedades, debido a la total asepsia
con que se trabaja, asegurando al productor un establecimiento
sin riesgo de enfermedades provenientes del material vegetativo.
Este servicio nos permite ofrecer plantas de la mejor calidad,
con certificación varietal y libres de virus.
Análisis Viral
Para el cultivo de arándanos, las enfermedades provocadas
por hongos y bacterias han sido satisfactoriamente controladas
mediante saneamiento y tratamientos químicos. Sin embargo,
las infecciones virales pueden dispersarse ampliamente debido
a sus estrategias de diseminación y una vez establecidas,
son difíciles de erradicar, provocando daños
y disminución de los rendimientos en las plantaciones
afectadas. Actualmente el uso de plantas libres de virus es
el medio más efectivo para el control de enfermedades
virales.
La detección de virus en plantas se realiza comúnmente
mediante pruebas serológicas utilizando el método
ELISA (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay). Este procedimiento
inmunoenzimático se basa en la detección de
un antígeno o anticuerpo inmovilizado sobre una fase
sólida mediante anticuerpos que directa o indirectamente
producen una reacción. En la actualidad se cuenta con
anticuerpos comerciales para detectar la mayoría de
los virus que afectan a los cultivos comerciales. Recientemente
se han desarrollado herramientas moleculares que permiten
una mayor eficacia en la detección de virus presentes
en plantas, dirigidas a la detección de material genético
viral en el vegetal y que se basan en reacciones de PCR (Polymerase
Chain Reaction). Se han reportado partidores para detectar
por métodos moleculares muchos de los virus que afectan
a los cultivos comerciales. Estos métodos no son excluyentes,
sino que normalmente se emplean conjuntamente para lograr
una mayor certeza en el diagnóstico. A lo cual puede
sumarse el empleo de plantas indicadoras.
Nuestra actual investigación consta de varias etapas,
en primera instancia evaluar la presencia, prevalencia y distribución
de ocho virus de relevancia económica en plantaciones
de arándanos. Una vez detectados los virus, desarrollaremos
una plataforma RT-PCR (PCR en tiempo real) para detectar mediante
técnicas moleculares los virus encontrados. El estudio
está dirigido a la detección de Tomato ringspot
virus y Tobacco ringspot virus, los cuales, de acuerdo a estudios
recientes, están presentes en plantaciones comerciales
de arándanos en Chile. Además de otros seis
virus que también afectan cultivos de arándanos
y hay reportes de su prevalencia en el hemisferio norte (Blueberry
scorch virus, Blueberry leaf mottle virus, Blueberry shock
virus, Blueberry shoestring virus, Strawberry latent rinspot
virus y Peach rosette mosaic virus); lo anterior dado que
la mayoría de las variedades de arándano que
se cultivan comercialmente en Chile son resultado de programas
de mejoramiento y selección realizados en Estados Unidos.
Con los resultados de esta línea de investigación
determinaremos cuales de los principales virus que afectan
al cultivo del arándano están presentes en la
región Centro Sur de Chile, su grado de prevalencia
y además estableceremos metodologías para su
detección con el fin de ofrecer al mercado la certificación
de plantas libres de virus.
Se espera poner, a partir del segundo semestre del
2011, a disposición del mercado este servicio. |
